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果胶酶测试盒(比色法)
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货号:A140-1-1
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产品关键词
Pectinase test kit
产品介绍

测定原理:
       果胶酶水解果胶生成半乳糖醛酸,具有还原性醛基,与DNS试剂反应生成红棕色物质,在540nm有特征吸收峰,测定540nm处吸光值变化可计算得果胶酶活性。

自备仪器或用品:
       天平、恒温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿(光径1cm)、恒温水浴锅。

试剂盒组成(50T/24 样):
提取液:液体50mL×1 瓶,4°C保存。
试剂一:液体30mL×1 瓶,4°C保存。
试剂二:粉剂×2瓶,4°C保存。临用前加入12.5mL试剂一,50°加热溶解,保存一周。
试剂三:液体30mL×1 瓶,4°C避光保存。

粗酶液提取:
      粗酶液提取详见试剂盒内说明书。测定细菌、组织和细胞时需要测定蛋白浓度。

操作步骤:


      对照管         测定管
     试剂二(ml)0.40.4

      50°C水浴孵育5min;


      对照管         测定管
      样本(ml)
0.1
    煮沸样本(ml)0.1

      混匀,50°C水浴反应30min;


      对照管         测定管
      试剂三(ml)0.50.5

 沸水浴5min,冰浴冷却终止反应,8000g,4°C,离心10min,取上清,波长540nm, 1mL
 玻璃比色皿(光径1cm),蒸馏水调零,测定各管吸光度值A,△A=A测定管-A对照管。

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