单分子级细胞定量分析系统：

Alba Q2是一款应用于实验室内定量生物学和材料科学研究，具有单分子级检测精度激光扫描显微成像系统。

Q2 主要特点:

·具有三个独立接口进行单光子和双光子激发

·2通道检测

·自动光圈控制系统

·快速扫描

·具有友善的软件操作界面，通过VistaVision软件系统可以得到FLIM/ FRET，RICS和FFS （FCS，PCH，scanning FCS，N&B）图像。

Q2测量:

·1p 或者 2p 共焦成像

·FLIM 荧光寿命成像（FastFLIM or TCSPC）

·PLIM磷光寿命成像

·偏振成像

·荧光光谱波动分析（FCS，FCCS，PCS，FLCS）

·RICS，N&B，Scanning FCS

·Burst Analysis

·FRET 高效检测

·3D粒子轨迹跟踪

·20nm分辨率纳米图像重构

激发模式：

·单光子激发模式（激光二极管和超连续激光）

·双光子激发模式（Ti-蓝宝石激光，光纤激光）

显微镜系统：

·Alba Q2 系统能够耦合到绝大多数荧光显微镜和正置、倒置显微镜上。

探测器：

·快速GaAs 探测器

·混合光电倍增管探测器

·雪崩光电二极管

Q2配置

1.Q2 was fully evaluated and validated for using ISS laser launcher， Fianium SC-400 laser and Toptica FemtoFiber Pro 2p laser.

2.VistaVision provides utilities for measurements in spectroscopy mode (at a single point)， raster or orbit scan mode (2D XY)， optical sectioning mode (3D)， time-lapse mode， stage scan mode for multi wells， or a combination of them.

Q2应用

• 强度和时间寿命成像(single plane and z-stack)

• 1p 或 2p共焦成像

• FLIM数字频域成像或 TCSPC

• 磷光时间寿命成像（PLIM）

• 偏光成像

• 单点模式测试

• 强度

• 偏振

• 动力学

• 寿命时间

• 荧光波动光谱(FFS)

• 荧光相关光谱（FCS）

• 荧光交叉相关光谱（FCCS）

• 光子计数直方图（PCH）

• 荧光寿命相关光谱（FLCS）

• Scanning FCS

• Number & Brightness （N&B）

• RICS （光栅成像相关光谱）

• 超高分辨率

• 3D粒子追踪

• 纳米成像

• 单分子测试

• Burst Analysis

• FRET and Correlation methods

• PIE-FRET methods

Q2示意图

Q2测量举例

共焦成像

铃兰样品共焦成像，荧光放射：600nm/37 nm

激发波长：561nm，显微镜：Olympus 20X水侵 /0.54NA，成像尺寸：1024 x 1024 pixels（200 μm x 200 μm）

Fluorescence Lifetime Imaging (FLIM)

铃兰样品，Ch1放射：600/37 nm，Ch2 放射：525/50nm

激发波长：488nm，40 MHz，显微镜：Olympus 60X/1.35NA

2p FLIM-FRET

mTurquoise-5aa-Amber （T5A）表达固定细胞（donor-alone控制） mTurquoise-5aa-Venus （T5V）表达固定细胞（FRET 标准）

激发波长：780nm，80MHz，反射波长/通道： 475/35nm，显微镜：Olympus 60X / 1.35NA

2p FLIM imaging of HE stained pig intestine tissue

激发波长: 780nm，80MHz，放射波长: 500 - 650 nm; 显微镜：Olympus 20X / 0.54NA，成像尺寸：1024 x 1024 （200 μm x 200 μm）

2p FCS

Fluorescein in HPLC water PH 7.4.

FFS系统能够对基于热运动分子波动化学动力学研究，主要包括：荧光相关光谱（FCS），荧光交叉相关光谱（FCCS）和光子计数直方图（PCH）。图为HPLC荧光试剂（PH 7.4）光谱图